一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes真核表达质粒的构建及功能
贾怡
李虹
陈文捷
吕梅励
李明远
蒋忠华
张林
1.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,6100412.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,6100413.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,6100414.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,6100415.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,6100416.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,6100417.四川大学基础医学与法医学院,四川,成都,610041
摘要：目的构建一种新型重组免疫毒素DT390-Rantes的真核表达质粒,并对这种免疫毒素的功能进行初步研究.方法通过RT-PCR的方法,从小鼠肝脏中获得Rantes基因;将Rantes基因插入到含有DT390片段的真核质粒SRα中,构建成重组质粒;重组质粒转入大肠杆菌JM109,筛选出含有正确插入片段的克隆;限制性内切酶酶切图谱分析重组质粒,并进行DNA序列分析;用脂质体介导法转染NIH3T3细胞,免疫荧光检测重组质粒的表达情况;MTT法测定DT390-Rantes的表达活性.结果经过酶切分析及DNA测序证实,Rantes基因正确插入到真核表达质粒SRα中,并在NIH3T3细胞中表达;MTT法证实,重组免疫毒素DT390-Rantes能在体外杀伤活化的T细胞.结论成功地构建了一种新型重组免疫毒素真核表达质粒DT390-Rantes-SRα,该质粒可在真核细胞中瞬时表达,其转染上清对活化的T细胞具有杀伤作用.
关键词：免疫毒素RantesDT390真核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：新材料领域项目(2002AA214101)国家自然科学基金(30221001)四川省应用基础研究计划(04JY029-002)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1344-1347 )
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