人CD40分子基因转染人脐静脉内皮细胞ECV-304
王维蓉1
林蓉1
杨玉琮2
甘伟杰1
刘俊田1
吕社民3
1.西安交通大学医学院药理教研室,陕西,西安,7100612.西安交通大学医学院第一医院实验医学中心,陕西,西安,7100613.西安交通大学医学院生物化学教研室,陕西,西安,710061
摘要：目的构建人CD40的真核表达载体,建立持续、稳定高表达CD40的人脐静脉内皮细胞ECV-304.方法将含有CD40的克隆载体pUCD40酶切后,再克隆到真核表达载体pCDNA3.1中,构建重组质粒pCDNA3.1(+)/CD40,并对重组质粒进行酶切鉴定.然后用脂质体法将重组质粒转染ECV-304,G418筛选转染的细胞.RT-PCR、Western-blotting和流式细胞仪定性定量检测转染后的ECV-304的CD40的表达情况.结果经酶切鉴定,重组体中已插入目的基因片段CD40.RT-PCR和Western-blotting证实,重组质粒转染的ECV-304中有CD40基因的表达,流式细胞仪检测转染后的ECV-304的CD40的表达率为95%.结论成功构建了真核表达载体pCDNA3.1(+)/CD40,并建立了高表达CD40的ECV-304,为筛选抗动脉粥样硬化药物奠定了基础.
关键词：CD40人脐静脉内皮细胞转染基因表达
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30371759)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1474-1477 )
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