应用限制性显示技术筛选K562细胞脱核前后差异表达基因
危敏1
马文丽1
宋艳斌1
毛向明1
李凌1
郑文岭2
1.南方医科大学分子生物学研究所,广东,广州,5105152.华南基因组研究中心,广东,广州,510860
摘要：目的应用限制性显示(RD)PCR技术筛选细胞松弛素B(CytochalasinB,CB)诱导K562细胞脱核前后的差异基因,探讨CB诱导细胞脱核的分子机制.方法用CB(终浓度为10μg/ml)处理K562细胞24 h,分别提取对照组和处理组细胞总RNA,将两组等量的细胞总RNA纯化为mRNA,反转录为cDNA,利用RD-PCR技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、筛选CB处理前后差异表达的基因.对筛选出的差异表达基因进行克隆、测序,在GenBank检索进行序列同源性分析.结果筛选及克隆了7个差异表达基因,其中水通道蛋白1(AQP1)基因经反转录PCR验证在CB诱导脱核的K562细胞中表达上调.结论AQP1基因在CB诱导K562细胞脱核过程中特异性高表达,提示其可能与细胞脱核及增殖抑制密切相关.
关键词：限制性显示PCRK562细胞细胞松弛素B水通道蛋白1差异表达
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(39880032)广州市科技攻关计划(99-Z-022-01)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 162-165 )
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