家族性肌萎缩侧索硬化症转基因鼠的繁殖和鉴定
黄慧1
张成1
席静2
姚晓黎1
邱国光3
熊符1
1.中山大学附属第一医院神经内科,广东广州,5100802.Laboratory for Neuromuscular Research, Massachusetts General Hospital East, Bldg 114,16th St,Charlestown MA, USA 021293.中山大学实验动物中心,广东广州,510080
摘要:目的建立家族性肌萎缩侧索硬化症(FALS)转基因模型鼠的繁育方法,并对其子代鼠进行基因鉴定.方法(1)以6只B6SJL SOD1G93A/+半合子雄鼠与6只B6SJLF1/J+/+雌鼠(1:1)交配;(2)由鼠尾血提取基因组DNA,PCR扩增hmSOD1基因的片段,电泳后观察结果;(3)对PCR产物进行纯化测序,并通过BLAST验证.结果6对种鼠交配产鼠仔53只,存活率为98%(52/53);G93AhmSOD1阳性鼠约占44.2%(23/52);PCR扩增产物分别为内对照(IL-2):324bp;Tg(hmSOD1):236 bp;测序证实PCR产物的基因序列和hmSOD1基因片段中的序列一致,并存在G93A突变.结论B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J雄鼠与B6SJLF1/J雌鼠配种能成功繁育出Tg(hmSOD1)阳性的ALS半合子子代鼠;本实验的PCR法能准确鉴定hmSOD1基因阳性鼠,并证实该转入的基因按近似孟德尔方式遗传,为ALS实验研究奠定了基础.
关键词:肌萎缩侧索硬化症繁殖小鼠转基因基因鉴定
分类号:R744.8(神经病学与精神病学)
资助基金:中国科学院项目(非规范项目)(30170337)广东省博士启动基金(31693)卫生部临床学科重点项目(2001321)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 258-260,265 )
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