人膀胱癌异质性表型相关基因的筛选与鉴定
杨玉琮
李旭
陈葳
1.西安交通大学医学院第一附属医院实验医学中心,陕西,西安,7100612.西安交通大学医学院第一附属医院实验医学中心,陕西,西安,7100613.西安交通大学医学院第一附属医院实验医学中心,陕西,西安,710061
摘要：目的筛选和鉴定膀胱肿瘤异质性生物学表型相关的基因.方法以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系为材料,采用抑制性削减杂交技术筛选差异表达的基因片段,构建cDNA文库;挑取克隆进行筛选,获得差异表达片段,测序并与Genbank比对,Northern blotting验证差异片段在两株细胞系的不同表达.结果建立了两个消减文库,分别含有168和206个白色克隆,白色克隆含有约200～700 bp的插入片段,对这些克隆进行筛选,获得35个差异表达基因片段,其中15个对应于细胞骨架蛋白、细胞代谢酶基因等已知基因,另外19个为未知功能基因,1个为新EST片段,注册Genbank(注册号为DR008207).结论抑制性消减杂交技术是筛选、克隆差异表达基因的有效手段;kratin 7、Vimentin等细胞骨架蛋白的不同表达,与细胞形态的表型差异有关;DDH等代谢基因的不同,与细胞的药物敏感性差异相关;筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础.
关键词：膀胱癌表型基因抑制性消减杂交
分类号：R596(全身性疾病)R737.14(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30370660)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 270-274 )
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