抗P-21激活的磷酸化蛋白激酶5多克隆抗体的制备及其在牙胚细胞研究中的应用
安政雯1
刘宏伟2
贾志敏3
李照峰4
Staffan Str(o)mblad5
张宏权5
1.南方医科大学,南方医院口腔科,广东,广州,510515;Karolinska Institute Department of Biosciences and Nutrition,Sweden Huddinge SE-141 572.南方医科大学,南方医院口腔科,广东,广州,510515;同济大学附属口腔医学院,上海,2000723.南方医科大学,药学院,广东,广州,5105154.南方医科大学,南方医院口腔科,广东,广州,5105155.Karolinska Institute Department of Biosciences and Nutrition,Sweden Huddinge SE-141 57
摘要：目的克隆PAK5-N端基因并诱导其表达,进行多克隆抗体制备,为研究其在牙胚细胞中的生物学功能奠定基础.方法根据人全长PAK5 cDNA序列,设计引物;利用PCR技术,以PAK5全长cDNA为模板扩增PAK5-N端基因,将扩增产物克隆至pGEX-4T-1载体中,经EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切后进行重组质粒鉴定,DNA测序.以硫代半乳糖苷诱导其在大肠杆菌BL21中表达.利用GST融合蛋白纯化系统进行蛋白纯化,通过免疫家兔制备多克隆抗体,并在牙胚细胞中进行了初步研究.结果和结论成功克隆了PAK5-N端基因,在E.coli中表达了PAK5-NT,并纯化了GST融合蛋白,制备了PAK5特异性抗体.Westernblotting表明PAK5在牙胚细胞中过度表达,为其在口腔细胞中的生物学功能研究提供了依据.
关键词：PAK5基因克隆蛋白表达多克隆抗体牙胚细胞
分类号：R392.4(医学免疫学)
资助基金：瑞典医学会资助项目(17450)瑞典癌症基金会资助项目(050373)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 730-733 )
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