构建EGFP-PDX-1融合表达载体电穿孔转染大鼠胎肝干细胞的研究
孙冰1
孙晓艳2
安靓1
1.南方医科大学组织胚胎学教研室,广东,广州,5105152.解放军总医院基础医学研究所,北京,100853
摘要：目的构建PDX-1绿色荧光蛋白融合表达载体,电穿孔转染入大鼠胎肝干细胞以得到稳定表达.方法从SK900/BLSCRIPT质粒中扩增PDX-1,将其插入pEGFP-C1的多克隆位点中,构建重组质粒pEGFP-C1-PDX-1;分离培养大鼠胎肝干细胞,经鉴定后用电穿孔法转染;分析转染前后细胞生长曲线,荧光显微镜下观察、RT-PCR鉴定转染结果.结果重组质粒经酶切鉴定正确无误,经电穿孔转染后GFP和PDX-1基因均能在胎肝干细胞中保持较长时间稳定表达,并对胎肝干细胞的生长增殖影响较小.结论成功构建了PDX-1绿色荧光蛋白融合表达载体,能在胎肝干细胞中较稳定表达,为研究PDX-1在干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞中的调控作用提供了物质基础.
关键词：肝干细胞绿色荧光蛋白载体构建胰十二指肠同源盒基因-1电穿孔
分类号：R321(人体形态学)
资助基金：广东省自然科学基金(2004B34001007)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 750-753 )
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