PEP-1-EGFP融合蛋白的表达和纯化及其转导入人脐静脉内皮细胞
董晓1
王家宁2
黄永章2
郭凌郧2
1.郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所,湖北,十堰,442000;武汉大学医学院,湖北,武汉,4300602.郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所,湖北,十堰,442000
摘要：目的 表达并纯化融合蛋白PEP-1-EGFP以对其穿透细胞膜的能力进行研究.方法 用分子克隆技术构建出表达型载体pET15b-pep-1-EGFP,在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白PEP-1-EGFP并进行Ni2+-树脂柱亲和层析纯化以进行融合蛋白穿透人脐静脉内皮细胞的实验.结果 经测序证实成功构建了表达型载体pET15b-pep-1-EGFP,PEP-1-EGFP融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,纯化后的蛋白浓度为6.18 mg/ml,蛋白产量为14.15mg/100 ml菌液,SDS-PAGE和Western blotting显示纯化蛋白为融合蛋白PEP-1-EGFP,细胞膜穿透实验证实PEP-1-EGFP融合蛋白能进入人脐静脉内皮细胞.结论 PEP-1-EGFP融合蛋白的表达和纯化及其穿膜能力的研究为PEP-1携带有生物活性的大分子物质进行蛋白治疗奠定了基础.
关键词：细胞穿透肽增强型绿色荧光蛋白原核表达蛋白转导人脐静脉内皮细胞
分类号：R392(医学免疫学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1114-1117 )
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