微孔杂交检测登革病毒及其分型方法的建立
任瑞文1
徐晓立1
李建军2
方美玉1
刘建伟1
马安德2
1.广州军区疾病预防控制中心,广东,广州,5105072.南方医科大学分析测试中心,广东,广州,510515
摘要:目的 建立特异、敏感、实用的登革病毒检测及分型方法.方法 分析登革1~4型病毒基因组序列,分别设计针对登革病毒1~4型的特异性包被探针,扩增、克隆测序后包被聚乙烯微孔板.PCR上游引物5'端标记生物素,对待检样品进行扩增后用作检测探针进行微孔杂交(PCR-ELISA)反应,并通过设定不同的包被DNA浓度、包被时间、杂交温度、杂交时间,对PCR-ELISA反应进行优化.结果 建立了快速、特异、敏感的登革病毒快速检测及分型方法,试验结果直观,阳性标本吸光度值在0.5以上,阴性结果吸光度值在0.1以下,S/N值在10以上.结论 所建立的方法可用作登革病毒感染的早期诊断及分型.
关键词:登革热病毒聚合酶链反应酶联免疫吸附测定杂交
分类号:R373.33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1356-1358,1362 )
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