人神经元特异性烯醇化酶蛋白表达及抗体制备
肖新莉1
韩俊2
张琳3
陈岚4
张瑾5
陈新林1
周伟2
姜惠英2
张宝云2
刘勇1
董小平2
1.西安交通大学医学院神经生物学研究所,陕西,西安,7100612.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京,1000523.西安市中心医院,陕西,西安,7100614.中国科学院生物物理研究所,北京,1001015.中国海洋大学食品科学与工程学院,山东,青岛,266003
摘要：目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.
关键词：神经元特异性烯醇化酶抗血清朊病毒病
分类号：R3(基础医学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1543-1547 )
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