IP-10重组腺病毒载体的构建及其病毒制备
邵紫韫
刘志锋
彭毅
徐佳
邓鹏
姜勇
1.南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105154.南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105155.南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105156.南方医科大学基础医学院广东省功能蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515
摘要:目的 利用细菌内同源重组法构建带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)重组腺病毒载体并制备重组腺病毒.方法 将IP-10编码序列克隆入带有EGFP示踪的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移载体pAdTrack-CMV/IP-10,将其在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd/IP-10;酶切鉴定正确后转染HEK293细胞.收集病毒上清,PCR鉴定正确后,扩增并再次感染HEK293细胞检测病毒感染能力.结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在HEK293细胞中包装成有感染活性的病毒颗粒.结论 成功地构建了表达IP-10蛋白的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒Ad/IP-10,为研究IP-10的蛋白功能提供了一个重要工具.
关键词:γ-干扰素诱导蛋白10增强型绿色荧光蛋白腺病毒
分类号:R3(基础医学)
资助基金:广东省自然科学基金(13058)广东省科技厅科技项目(A1090202)广州市科技攻关计划(2001-z-035-01-1)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1552-1555 )
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