小鼠TLR-2N末端基因的克隆表达和抗体制备
杨翠兰1
赵文忠2
刘艳君1
朱平1
富宁1
1.南方医科大学免疫教研室,广东,广州,5105152.中山大学基础医学院,广东,广州,510080
摘要：目的 克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2 N末端的多克隆抗体.方法 采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1～153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免疫家兔制备多克隆抗体,采用免疫组化、流式细胞术及间接ELISA检测抗体特异性及效价.结果 成功构建了融合表达载体pET-N,表达和纯化了相应的融合蛋白,所制备多克隆抗体可与pGEX-N表达的融合蛋白反应,并可结合表达TLR-2的RAW264.7及转染mTLR-2全长基因的CHO细胞.结论 获得了mTLR-2 N末端重组融合蛋白及其可与天然mTLR-2结合的多克隆抗体.
关键词：mTLR-2重组蛋白抗体克隆基因表达
分类号：R3(基础医学)
资助基金：广东省自然科学基金(020017)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1609-1611,1615 )
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