两种样品制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳分离效果的影响
赵亮1
丁彦青1
梁莉2
李欣1
李雪华3
吴丽莎4
1.南方医科大学病理学教研室,广东,广州,510515;南方医科大学教育部和广东省共建重大疾病转录组学及功能蛋白质组学重点实验室/广东省分子肿瘤病理重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学病理学教研室,广东,广州,5105153.南方医科大学武警医学院病理学教研室,天津,3001624.南方医科大学教育部和广东省共建重大疾病转录组学及功能蛋白质组学重点实验室/广东省分子肿瘤病理重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的 评价两种样品制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响,建立高分辨率、高重复性的血清2-DE图谱,为鉴定疾病相关血清蛋白质奠定基础.方法 分别用热SDS法和直接溶解法处理大肠癌血清样品,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离总蛋白质,图像软件分析后,对其中3个差异蛋白质点行基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱鉴定.结果 应用热SDS法处理血清总蛋白质进行双向电泳,可获得分辨率高、重复性好的人血清双向电泳图谱.对直接溶解和热SDS法处理的蛋白样品进行3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数为675±46和702±49,平均匹配点数为573±42和623±52,匹配率为85.3%和89.6%,分析3块不同胶间蛋白质点在IEF方向的位置偏差为(0.85±0.30)mm和(0.81±0.28)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.02±0.18)mm和(0.97±0.12)mm.热SDS处理的2-DE胶蛋白质点质谱可获得高质量质谱图,并可以检测到相对低丰度的血清蛋白质.结论 热SDS法是一种更有效的血清蛋白质样品制备方法,我们利用热SDS法处理血清样品建立了分辨率较高且重复性好的人血清蛋白质双向凝胶电泳图谱.
关键词：人血清蛋白质样品制备双向凝胶电泳蛋白质组
分类号：R730.3(一般性问题)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2001CB510207)广东省科技厅科技项目(2003A308401)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 5-8 )
英文信息