结核分枝杆菌H37Rv株Rv1494和Rv1495假想蛋白基因的克隆表达
商正玲
鲍朗
姚素霞
张会东
1.四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,6100412.四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,6100413.四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,6100414.四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041
摘要：目的 为探索参与调控结核分枝杆菌(MTB)持续性感染的相关分子,对MTB H37Rv株编码Rv1494、Rv1495假想蛋白基因进行克隆、表达及Western blotting鉴定.方法 采用Bioedit、Dnaman软件及Pfam数据库对MTB H37Rv株Rv1494、Rv1495基因编码蛋白质的氨基酸组分、蛋白模块以及其与大肠杆菌E.coli的mazEF蛋白家族的同源性进行分析.以H37Rv株基因组为模板,分别对Rv1494、Rv1495基因进行克隆,构建pET32a(+)原核表达质粒,转化BL21宿主菌.重组蛋白经SDS-PAGE电泳分离纯化和Western blotting鉴定.结果 生物信息学分析提示,Rv1494基因、Rv1495基因编码的蛋白质分别与大肠杆菌E.coli染色体编码的mazEF家族中的抗毒素和毒素具有一定程度的同源性,分别为26%和29.75%;经测序表明原核表达重组质粒构建成功.负载重组质粒的BL21菌经IPTG诱导后可表达出分子大小与预期值相一致的融合蛋白,表达量均可达到菌体总蛋白的60%.重组蛋白经Western blotting检测出特异性阳性信号.结论 首次对MTB H37Rv株编码Rv1494、Rv1495假想蛋白基因进行克隆表达,为进一步探讨该基因在参与调控MTB持续性感染过程中的功能奠定基础.
关键词：结核分枝杆菌Rv1494基因Rv1495基因克隆表达
分类号：R394.2(医学遗传学)R378.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30271172)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 15-19 )
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