广州管圆线虫半乳凝素基因的克隆表达、蛋白纯化及免疫反应性研究
郝丽1
吴焜2
陈晓光2
王琼2
1.广州军区疾病预防与监控中心2.南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的 构建在E.coli中高效表达广州管圆线虫半乳凝素蛋白的重组表达质粒,并对重组蛋白纯化条件进行优化及免疫反应性鉴定.方法 根据本室构建的广州管圆线虫幼虫cDNA文库EST测序结果,筛选出有诊断潜能的半乳凝素基因,经过PCR扩增其cDNA全长序列后克隆入pET32a(+)载体进行诱导表达,包涵体经洗涤、变性、逐步透析复性,浓缩后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹.结果 本研究首次克隆出广州管圆线虫半乳凝素蛋白基因全长cDNA序列(GenBank收录编号为DQ384534).成功构建重组质粒pET32a(+)-Ac GAL,通过IPTG诱导得到以包涵体形式表达的重组融合蛋白,Western-blot结果显示纯化的重组蛋白具有良好的免疫反应性.结论 克隆表达了广州管圆线虫半乳凝素基因,为广州管圆线虫病诊断研究奠定了基础.
关键词：广州管圆线虫克隆表达纯化免疫反应性
分类号：R383.1(医学寄生虫学)R392.2(医学免疫学)
资助基金：科技部科技攻关计划(2003BA712A03-07)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 584-587 )
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