幽门螺杆菌尿素酶B亚单位功能片段的纯化及活性研究
袁小澎1
邹全明2
柏杨2
杨珺2
郭鹰2
张卫军2
刘正祥2
1.南方医科大学珠江医院检验科,广东,广州,5102822.第三军医大学生物临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,430038
摘要：目的 建立一种有效的尿素酶功能片段的纯化方法.方法 应用已构建的尿素酶B功能片段表达载体,IPTG诱导表达,包涵体鉴定试验判断目的蛋白表达形式,AKTA100上分别采用亲和层析和离子层析等多级纯化方式优化纯化条件,HPLC检测纯化蛋白纯度,尿素酶活性阻断试验对纯化后功能片段进行活性鉴定.结果 IPTG诱导后目的蛋白高表达,包涵体鉴定试验证实目的蛋白以可溶形式存在宿主细胞中,优化后方案得到目的蛋白纯度＞90%且能被尿素酶B免疫的兔血清识别,纯化后蛋白免疫家兔后产生兔抗血清能够特异性中和Hp尿素酶活性.结论 成功建立了尿素酶功能片段的纯化方法.
关键词：幽门螺杆菌蛋白纯化尿素酶B
分类号：R58(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2001AA2151611)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 959-962 )
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