晚期糖基化终末产物受体真核表达载体的构建与表达
李煜生
龚小卫
程蔚蔚
魏洁
姜勇
1.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105154.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105155.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的 构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体真核细胞表达载体.方法 采用PCR方法从人cDNA文库中扩增RAGE基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pcDNA3真核表达载体中,对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.以RAGE/pcDNA3重组质粒为模板,运用突变方法在RAGE氨基末端信号肽后插入HA序列.利用Western blotting在HEK 293细胞中对经过测序鉴定的HA-RAGE\pcDNA3重组质粒的表达进行了检测.结果 RAGE/pcDNA3重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,HA-RAGE\pcDNA3重组质粒可在HEK 293细胞中表达.结论 成功构建了带HA标签的RAGE真核细胞表达载体,该载体能在真核细胞中表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导途径中的作用提供了一个重要的工具.
关键词：RAGE载体构建基因表达
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2001AA234061)广东省科技厅科技项目(A1090202)广东省自然科学基金(13058)广州市科技计划(2001-z-035-01-1)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 983-986 )
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