重组腺病毒Ad-HGF转染骨髓基质干细胞及其表达的实验研究
温茜1
马骊1
金丹2
崔建德2
罗微1
王小宁3
1.南方医科大学,生物技术学院分子免疫学研究所,广东,广州,5105152.南方医科大学,南方医院创伤骨科,广东,广州,5105153.华南理工大学,生物科学与工程学院,广东,广州,510641
摘要：目的 构建人肝细胞生长因子(HGF)重组腺病毒表达载体,体外转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),检测HGF基因表达,探讨转HGF基因的BMSCs治疗股骨头缺血性坏死(ANFH)的可行性.方法 利用RT-PCR方法,从共表达人HGF-Met的NIH3T3-H0细胞株中扩增人HGF cDNA,插入腺病毒穿梭质粒pDC316,与辅助质粒共转染HEK293细胞,重组产生重组腺病毒Ad-HGF,PCR鉴定毒种正确后,在293细胞中扩增、纯化,TCID50法测定感染性滴度,然后感染BMSCs,RT-PCR、原位杂交、免疫组化检测转染后细胞中HGF的转录和表达.结果 成功制备了Ad-HGF,感染性滴度为2.6×1010TCID50/ml,转染后的BMSCs在mRNA和蛋白水平均有HGF表达.结论 获得高表达人HGF基因的BMSCs,为其用于早期ANFH的治疗奠定了基础.
关键词：肝细胞生长因子腺病毒载体骨髓基质干细胞股骨头坏死生物治疗
分类号：R687(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2007AA02Z458)广东省科技攻关计划(2005B34001004)广州市科技攻关计划(2005Z3-E0151)广东省医学科学技术研究项目(B2005083)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1627-1630,1634 )
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