HCBP1的细胞定位及与HCV核心蛋白在体内的相互作用
陈天艳
刘敏
陈云茹
蔺淑梅
叶峰
张曦
刘锦锋
赵英仁
张树林
1.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100612.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100613.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100614.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100615.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100616.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100617.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100618.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,7100619.西安交通大学医学院第一附属医院传染科,陕西,西安,710061
摘要：目的 探讨HCV核心蛋白与(HCBP1)HCV核心蛋白的相互作用蛋白在真核细胞内的相互作用.构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与HCBP1融合蛋白真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位.方法 PCR分别扩增含HCV核心及HCBP1的cDNA片段,克隆入pGEMT载体,经测序正确后,分别克隆入哺乳双杂交的表达质粒pM和pVP16中,并转染入COS-7细胞,48 h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平.将HCBP1的cDNA片段克隆入绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,转染COS-7细胞,以Western blot和荧光显微镜分析融合蛋白的表达及其细胞定位.结果 CAT-ELISA检测显示pM-核心蛋白与pVP16-HCBP1实验孔吸光度值高于其他阴性对照,但低于阳性对照组.成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,Western blot证实融合蛋白在转染细胞中的表达,荧光显微镜示HCBP1-EGFP融合蛋白分布于细胞浆,而转染空载体的细胞内EGFP的分布无明显改变.结论 成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白表达载体,并在COS-7细胞中得到表达.哺乳双杂交系统证实HCV核心蛋白与新基因HCBP1确有一定的相互作用.
关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白哺乳动物双杂交绿色荧光蛋白融合蛋白
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30471532)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1809-1812 )
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