携带反义热休克蛋白70抑制人喉癌细胞的生长
王晓侠1
姚小宝2
嵇宪生1
李胜利3
朱宏亮2
樊代明4
1.解放军451医院耳鼻喉科,陕西,西安,7100542.西安交通大学第一医院耳鼻喉科,陕西,西安,7100613.西安交通大学第二医院耳鼻喉科,陕西,西安,7100044.第四军医大学西京医院消化病研究所,陕西,西安,710032
摘要：目的 构建携带反义热休克蛋白70(HSP70)的重组腺病毒载体以用于喉癌的基因治疗研究.方法 将HSP70基因片段反向克隆到腺病毒载体质粒PAdTrack-CMV上,与骨架质粒在大肠杆菌Bj5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增后得到携带反义HSP70的重组腺病毒AdEasy-GFP-ASHSP70.结果 成功的构建携带反义HSP70的重组腺病毒载体系统,经测病毒滴度可达8×109.HSP70反义RNA阻断了Hep-2细胞的HSP70的表达,经Western blotting和免疫组化证实,实验组瘤细胞不能表达或低表达HSP70,而对照和空载体组高表达HSP70.转染反义HSP70的腺病毒载体的Hep-2细胞比空载体组和对照组的细胞生长缓慢,细胞周期可见实验组出现亚二倍凋亡峰,而空载体组没有.结论 构建的重组腺病毒AdEasy-GFP-ASHSP70可望有效地将反义HSP70导入人喉癌细胞株,为进一步研究喉癌基因治疗提供实验基础.
关键词：反义热休克蛋白70重组腺病毒喉癌
分类号：R739.65(耳鼻咽喉肿瘤)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1888-1891 )
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