人血小板衍生生长因子BB原核表达及生物学活性鉴定
杨春露1
陈建庭2
邓凡3
王建钧2
罗深秋3
金大地2
1.武警辽宁省总队医院骨科,辽宁,沈阳,1100342.南方医科大学,南方医院脊柱骨病科,广东,广州,5105153.南方医科大学,细胞生物教研室,广东,广州,510515
摘要：目的 表达人血小板衍生生长因子(PDGF)BB蛋白并进行生物学活性鉴定.方法 基因扩增方法获得人PDGF-B基因;原核表达PDGF-BB蛋白,并纯化、复性;免疫印迹分析重组蛋白的免疫原性;应用培养的大鼠成骨细胞对其生物学活性进行鉴定.结果 扩增出327bp目的基因,与预期结果吻合,DNA序列分析正确.SDS-PAGE和免疫印记检测表明获得新生蛋白的分子量及免疫原性均与预期符合.体外细胞学鉴定表明,获得的rhPDGF-BB可明显促进大鼠成骨细胞的增殖和DNA复制,表明重组的PDGF-BB具有较好的生物学活性.结论 PDGF-B成熟肽基因克隆成功并成功地在大肠杆菌中实现了高表达.复性后细胞学MTT和FCM鉴定表明获得的rhPDGF-BB具有较好的生物学活性,为生产活性PDGF-BB蛋白及其在促进骨组织和创伤修复方面的进一步功能研究奠定了基础.
关键词：血小板衍生生长因子基因克隆原核表达纯化生物学活性鉴定
分类号：R349.64(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30271321)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 166-168,172 )
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