两种细胞系中内源性C-反应蛋白的表达和定位分析
陈腾祥1
李红梅2
胡水旺2
杨婷3
刘亚伟2
刘靖华2
姜勇2
1.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515贵阳医学院生理学教研室,贵州,贵阳,5500042.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学贵阳医学院生理学教研室,贵州,贵阳,550004
摘要：目的 观察在不同刺激条件下,不同组织来源细胞系中内源性C-反应蛋白(CRP)的表达及定位情况.方法 培养人单核细胞系THP-1和人肝细胞系LO2,用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞;使用内毒素(LPS)对两种细胞进行刺激,同时收集LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清加人到LO2细胞的培养液中进行孵育,运用Westernblot和免疫细胞化学技术检测上述刺激条件下CRP在两种细胞中的表达及其定位情况.结果 Western blot检测表明,在未受到刺激时,两种细胞的裂解物中均检测到一定量的CRP,在细胞培养液上清中没有检测到;受到LPS刺激后,THP-1细胞内的CRP表达增加,且在培养液上清中也检测到少量的CRP,但对于LO2细胞,刺激前后CRP的表达和分泌没有明显变化:当用LPS刺激后的THP-1细胞的培养液上清处理LO2细胞后,在LO2的细胞裂解物和培养液上清中均检测到CRP.免疫细胞化学检测结果显示,整个THP-1细胞中均可检测到标记的CRP的荧光信号,其中以核内的最明显.LPS刺激可以增加该蛋白的表达,使其核定位更加明显;在LO2细胞中,CRP定位于核外,LPS刺激对其表达和定位没有明显影响.而给予LPS刺激的THP-1细胞培养液上清处理后,LO2细胞中标记CRP的荧光信号增强,尤其以细胞膜上的增强明显.结论 LPS不能直接上调肝细胞LO2内的CRP表达,却可以诱导THP-1表达分泌某些细胞因子来增加CRP的合成分泌;CRP在肝细胞系LO2和单核.巨噬细胞系THP-1中的定位有明显不同,在LO2中主要表现为分泌型蛋白的定位特征,而在THP-1细胞中却有明显的核定位表现.
关键词：C-反应蛋白蛋白表达蛋白定位单核细胞肝细胞佛波酯内毒素
分类号：R364.5(病理学)R392.12(医学免疫学)
资助基金：长江学者和创新团队发展计划(IRT0731)国家自然科学基金(U0632004)国家自然科学基金(30670828,30670829)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 675-678 )
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