RNAi靶向人端粒酶逆转录酶对人肝癌细胞的生长抑制作用
李华1
王欣璐2
杨扬1
张剑1
汪根树1
姜楠1
陈规划1
1.中山大学附属第三医院肝脏移植中心,广东,广州,5106302.广州军区广州总医院核医学科,广东,广州,510010
摘要:目的 利用RNAi技术降低人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,抑制其活性,研究其对人肝癌细胞的增殖和凋亡影响.方法 构建针对hTERT基因的siRNA真核表达载体pLXSN-EGFP-U6-siTERT,制备靶向hTERT的重组逆转录病毒;用重组逆转录病毒感染HepG2人肝癌细胞,以TRAP法检测端粒酶活性变化;流式细胞仅检测细胞凋亡率;MTT法检测肿瘤细胞生长抑制情况.结果 成功制备出hTERT siRNA逆转录病毒表达载体;重组病毒感染HepG2细胞24、48、72 h后端粒酶活性分别下降了23.84%、58.03%和85.01%(P<0.05);感染后24 h细胞凋亡率29.05%;MTT实验结果显示肿瘤生长受到抑制,并存在一定量效和时效关系.结论 hTERT siRNA能特异性使hTERT基因表达抑制,端粒酶活性下降,肝癌细胞增殖受到抑制.
关键词:RNA干扰人端粒酶逆转录酶基因治疗细胞凋亡
分类号:R345(基础医学)R735.7(消化系肿瘤)
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2003CB515507;30772135)广东省自然科学基金(06021352)广东省医学科学技术研究项目(A2005239)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1323-1326 )
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