利用质粒介导的miRNA-1-2抑制H9C2中Hand2蛋白的表达
单志新
林秋雄
邓春玉
周志凌
张绪超
符永恒
余细勇
1.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100802.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100803.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100804.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100805.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100806.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100807.广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,510080
摘要：目的 构建人miRNA-1-2的真核表达载体,并检测其对大鼠成肌细胞H9C2中Hand2蛋白表达的抑制作用.方法 用PCR法体外合成miRNA-1-2前体序列的DNA模板.并定向插入到发夹RNA(hairpin RNA)表达载体pSilencer-4.1-neo上.用脂质体法将构建正确的重组质粒pSilencer-4.1/nfiRNA-1-2瞬时转染H9C2细胞.检测miRNA-1-2前体转录本(pre-miRNA-1-2)和miRNA-1靶基因Hand2(heart andneural crestderivatives expressedtranscript2)的表达.结果 DNA测序表明重组质粒pSilencer-4.1/miRNA-1-2构建正确.pSilencer-4.1/miRNA-1-2转染的H9C2细胞中.pre-miRNA-1-2被有效表达,Hand2 mRNA表达无变化,Hand2蛋白表达被抑制.结论 成功构建了miRNA-1-2的真核表达载体,由表达载体介导的miRNA-1能有效抑制Hand2蛋白的表达.
关键词：miRNA-1载体构建Hand2表达
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30300421)国家自然科学基金(30672077)广东省自然科学基金(06020831)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1559-1561,1567
)
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