人脂联素球型结构域原核表达重组质粒的构建及体外表达
蒲素
余叶蓉
龙阳
1.四川大学华西医院内分泌科,四川,成都,6100412.四川大学华西医院内分泌科,四川,成都,6100413.四川大学华西医院内分泌科,四川,成都,610041
摘要：目的 通过分子克隆表达人脂联素基因球型结构域(gAd),为进一步研究提供实验基础.方法 应用RT-PCR方法从人大网膜脂肪组织总RNA中扩增出gAd cDNA,克隆人载体pMD18-T,pET32a(+)中,形成重组质粒gAd.pET32a(+).筛选出阳性克隆,通过限制性内切酶酶切、PCR和测序进行鉴定,并在体外进行小量表达.结果 从脂肪组织总RNA中扩增得到412 bp片段gAd基因,其cDNA序列与GenBank人gAd基因序列相同,并在体外表达得到相对分子质量为34000的重组蛋白.结论 成功构建了gAd基因原核表达质粒并实现体外的小量表达.
关键词：脂联素球型结构域分子克隆pET32α(+)质粒
分类号：Q319(遗传与变异)
资助基金：国家自然科学基金(30570874)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1614-1616 )
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