mCD99L2基因干扰慢病毒载体的构建与鉴定
张弓1
刘芳1
陈小艳1
方唯意2
李慧灵1
黄作平1
褚红娟1
王辛1
赵彤3
1.南方医科大学南方医院病理科,广东,广州,510515
2.南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学南方医院病理科,广东,广州,510515;南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的 构建mCD99L2(mouse CD99 antigen-like 2)基因RNA干扰慢病毒表达载体,检测其对293FT细胞的感染效率.方法 应用基因工程技术,首先设计并合成4对siRNA序列,退火、酶切并连接于慢病毒表达载体SD1259,构建携带针对目的 基因mCD99L2的siRNA慢病毒穿梭质粒表达载体(其中包括1条阴性对照序列);然后使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒穿梭质粒共转染293FT细胞,转染48 h后收集上清离心过滤,浓缩病毒,利用绿色荧光蛋白作为报告基因,对病毒滴度和感染效率进行检测.结果 构建3个携带针对目的 基因mCD99L2的siRNA慢病毒穿梭质粒表达载体和1个阴性对照质粒,经测序鉴定正确;共转染293FT细胞包装病毒并浓缩后滴度达1×107/ml,适合感染目的 细胞.结论 应用基因工程技术成功构建了mCD99L2基因RNA干扰慢病毒表达载体,为进一步构建类人霍奇金淋巴瘤可视化细胞模型及动物模型奠定了基础.
关键词：慢病毒mCD99L2RNA干扰霍奇金淋巴瘤
分类号：R363(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(30670812)国家自然科学基金(30770908)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 228-231 )
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