Balb/Cdx鼠甘露聚糖结合凝集素-A糖识别域的原核表达
左大明
张丽芸
卢晓
陈政良
1.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,5105152.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,5105153.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,5105154.南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,510515
摘要：目的 获取具有生物学活性的Balb/C小鼠血清型甘露聚糖结合凝集素(MBL-A)糖识别域(CRD)蛋白.方法 应用PCR从含Balb/C小鼠MBL广A基因的质粒pmMBL-A中扩增目的 基因片段,将其克隆至原核表达载体pET41a(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的 蛋白.表达产物(包涵体)经洗涤和复性处理后,利用GST柱纯化,以SDS-PAGE、Western blotting和ELISA进行分析鉴定.结果 从pmMBL-A中扩增到约450 bp的DNA片段,构建重组载体pET41a-mMBL-A-CRD,经酶切和测序鉴定后,将其导人大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物主要以包涵体形式存在,其相对分子质量约47 000.包涵体经洗涤及复性处理,GST柱纯化后,融合蛋白的纯度达90%以上.Westemblotting显示重组融合蛋白与抗GST抗体特异性反应,糖结合试验表明表达产物具有生物学活性.结论 成功获得了具有生物学活性的Balb/C小鼠MBL-A CRD蛋白,为MBL-A分子的研究奠定了一定基础.
关键词：甘露聚糖结合凝集素糖识别域原核表达天然免疫
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：广东省自然科学基金研究团队项目(015003)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 267-270 )
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