α1-抗胰蛋白酶真核表达载体的构建及其细胞内定位
刘承武
胡水旺
陈登宇
冯国开
邓鹏
姜勇
1.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105154.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105155.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105156.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的 构建鼠α1-抗胰蛋白酶(AAT)的真核表达载体,观察其在NIH 3T3细胞中的表达及定位情况.方法 提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过RT-PCR扩增得到AAT编码序列.然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH 3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果.结果 重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定证明构建正确.转染实验发现,该质粒能够在NIH 3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中.结论 成功构建带HA标签的AAT真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究AAT在细胞内的相关生物学功能提供了一个重要工具.
关键词：α1-抗胰蛋白酶血凝素细胞内定位载体构建
分类号：R363.21(病理学)
资助基金：长江学者和创新团队发展计划(IRT0731)国家自然科学基金(U0632004)国家自然科学基金(30670828,30572151)广州市科技计划(2007J1-C0301)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 408-411 )
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