应用RNA干扰技术建立PRL-3和CDH22双基因表达抑制的结直肠癌细胞模型
姚娟
丁彦青
周军
柳玉红
李建明
1.南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学系,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广东,广州5105152.南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学系,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广东,广州5105153.南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学系,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广东,广州5105154.南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学系,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广东,广州5105155.南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学系,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广东,广州510515
摘要：目的 建立稳定干扰PRL-3及CDH-22基因的结直肠癌细胞株,为探讨PRL-3、CDH22及其相互作用在结直肠发生及转移中的作用提供理想的细胞模型.方法 以稳定干扰人PRL-3基因大肠癌SW480细胞的克隆为基础,以靶向人CDH22基因的RNAi慢病毒再次感染该细胞株,将经慢病毒二次感染的细胞悬液通过有限稀释法制备细胞单克隆,各细胞克隆扩大培养,荧光定量PCR检测各细胞克降PRL-3及CDH22mRNA表达水平.结果 应用于二次感染的慢病毒悬液的滴度为8×105U/ml.综合分析荧光定量PCR结果,所获得的细胞克隆中1号克隆PRL-3及CDH22mRNA水平的表达显著降低.结论 成功建立PRL-3及CDH-22基因稳定敲低的大肠癌细胞克隆,探索同时敲低2个基因的慢病毒RNAi技术.
关键词：PRL-3CDH22RNA干扰慢病毒结直肠癌
分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金资助项目(30500241、30670968和30700286)广东省自然科学基金重点项目(5200512)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 593-597 )
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