大鼠干扰素诱导蛋白-10的体外表达和鉴定
赵玉杰
林媛
李明远
李虹
蒋忠华
1.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院微生物学教研室,四川,成都,6100412.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院微生物学教研室,四川,成都,6100413.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院微生物学教研室,四川,成都,6100414.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院微生物学教研室,四川,成都,6100415.四川大学华西医学中心基础医学与法医学院微生物学教研室,四川,成都,610041
摘要：目的 构建大鼠干扰素诱导蛋白-10(IP-10)真核表达载体,在NIH3T3细胞中表达重组载体pcDNA3.1(+)-IP-10,并对其表达产物进行鉴定.方法 通过PCR扩增IP-10基因片段,通过酶切和连接反应,构建IP-10的真核表达载体pcDNA3.1(+)-IP-10,重组载体经限制性内切酶、PCR及DNA序列测定等证实构建成功后,用PolyFect脂质体转染NIH3T3细胞,免疫荧光技术检测pcDNA3.1(+)-IP-10在NIH3T3细胞的表达情况.转染的Nm3T3细胞通过G418筛选出稳定表达的细胞克隆,Western Blotting鉴定IP-10蛋白在细胞培养上清的表达情况.结果 酶切分析、PCR及DNA序列测定证实,IP-10基因被成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),免疫荧光技术检测证实重组载体可在NIH3T3细胞表达.Western Blotting结果显示细胞培养上清有IP-10蛋白表达.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-IP-10,为进一步研究其对Th1型自身免疫性疾病的治疗效果奠定基础.
关键词：干扰素-γ诱导蛋白10真核表达自身免疫性疾病
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30470613)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 615-618 )
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