慢病毒介导的siRNA靶向干扰EIF4G1鼻咽癌稳定细胞株的建立
涂露霞
方唯意
刘真
李欣
何英
谢思明
姚开泰
1.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,5105154.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,5105155.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,5105156.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,5105157.南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的 检测人真核翻译起始因子4G1(EIF4G1)基因在8株鼻咽癌细胞中的差异表达,寻找最高表达的细胞株.构建EIF4G1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,建立稳定干扰EIF4G1表达的鼻咽癌细胞株,测定干扰效率.方法 应用荧光定量PCR检测EIF4G1 mRNA在鼻咽癌细胞株5-8F、6-10B、C666-1、CNE1、CNE2、HNE1、HONE1、SUNE1表达水平.构建重组靶向EIF4G1 shRNA慢病毒表达质粒pLenti6/BLOCK-iT-DEST/EIF4G1shRNA.用293FT细胞包装后产生的成熟慢病毒颗粒感染5-8F细胞.经杀稻瘟菌素筛选后,建立稳定表达siRNA的5-8F鼻咽癌细胞株.最后荧光定量PCR检测干扰效率.结果 在8个鼻咽癌细胞株中,EIF4G1显示在5-8F细胞株中表达最高.PCR和测序验证pLenti6/BLOCK-iT-DEST/EIF4G1shRNA重组质粒构建成功;经293FT细胞病毒包装,感染5-8F细胞后,与阴性对照组和未十扰组相比可明显抑制EIF4G1 mRNA水平EIF4G1表达.结论 成功构建TpLenti6/BLOCK-iT-DEST/EIF4G1shRNA慢病毒重组质粒,建立了稳定靶向干扰EIF4G1表达的siRNA5-8F鼻咽癌细胞株.
关键词：真核翻译起始因子4G1慢病毒重组质粒RNA干扰鼻咽癌细胞
分类号：R365(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(30872856)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 844-847,851 )
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