逆转录病毒介导的SHP-1基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达
梁继珍
李荣
张军一
郑航
罗荣城
1.南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东,广州,5105152.南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东,广州,5105153.南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东,广州,5105154.南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东,广州,5105155.南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东,广州,510515
摘要：目的 构建逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1.获取重组逆转录病毒.并将SHP-1基因转导入乳腺癌MDA-MB-231细胞株.方法 采用RT-PCR方法从高表达SHP-1的人乳腺癌细胞株MCF-7中克隆出SHP-1基因全长cDNA,构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,通过脂质体介导将其转染入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株,将病毒感染人乳腺癌细胞MDA-MB-231.采用Western blotting方法检测SHP-1基因在MDA-MB-231细胞中的表达情况.结果 成功构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-SHP-1,转染包装细胞PT67,筛选出对G418具有稳定抗性的克隆PT67/SHP-1,获取重组逆转录病毒上清液,并感染人乳腺癌细胞MDA-MB-231.从蛋白水平证实,感染后的MDA-MB-231有SHP-1基因的表达.结论 将SHP-1基因定向克隆入逆转录病毒载体的方法可成功获取重组逆转录病毒,感染MDA-MB-231细胞得到稳定表达SHP-1基因MDA-MB-231/SHP-1,为进一步研究奠定了基础.
关键词：SHp-1酪氨酸磷酸酶乳腺肿瘤基因重组逆转录病毒
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：广东省科技计划(2008B030301143)中国临床肿瘤学科学基金(Y-2006-0009)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 902-905 )
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