PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制
陈丽丽1
罗雅玲1
赖文岩2
徐健3
钟浩海1
张达成1
叶涵1
1.南方医科大学南方医院呼吸内科,广东,广州,5105152.南方医科大学南方医院心内科实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学南方医院肾移植科,广东,广州,510515
摘要:目的 观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC)后的表达,研究其对HASMC增殖的影响,并对其作用机制作初步的探讨.方法 利用pAdxsi载体系统构建携带PTEN基因的腺病毒载体,体外转染HASMC,荧光显微镜观察Ad-PTEN的转染效率.RT-PCR及Western blotting检测PTEN在HASMC中的表达.采用MTS/PMS法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布.Western blotting检测Akt及p-Akt的表达,RT-PCR检测P2lmRNA的表达.结果 外源性野生型PTEN基冈经腺病毒介导成功转入HASMC,当感染复数MOI为100时,体外转染效率高达98%以上.Ad-PTEN感染HASMC后,能有效地引起细胞内过度表达PEEN.上调PTEN表达能显著提高G0/G1期细胞的比例,抑制细胞的增殖.上调PTEN表达能显著降低p-Akt及提高P21的表达水平.结论 成功构建了过度表达PTEN的原代培养HASMC模型,该模型能有效地引起细胞内过度表达PTEN.上调PTEN表达能有效抑制HASMC的增殖,可能是通过对P13K/AKt信号通路的抑制及上调P21的表达而起作用的.
关键词:哮喘气道平滑肌细胞PTEN细胞增殖AKT
分类号:R562.25(呼吸系及胸部疾病)R392.1(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(30770936)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1102-1105 )
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