大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP质粒的构建及其在HEK293细胞中的表达
胡子有1
漆松涛2
张遐3
曹琼1
吴炳义1
1.南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心,广东,广州,5105152.南方医科大学南方医院神经外科,广东,广州,5105153.Institute of Mental Health Research,University of Ottawa,Ottawa,Canada
摘要：目的 构建大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP表达质粒,并实现其在HEK293细胞的表达.方法 提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增δ受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切、连接克隆人pIRES2-EGFP中,将获得的δ-pIRES2-EGFP重组子转染人HEK293细胞中,应用荧光显微镜观察EGFP和δ基因表达情况.结果 酶切和测序结果表明δ基因正确构建入 pIRES2-EGFP表达质粒中,转染了重组子的HEK293细胞在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,应用细胞免疫荧光,可以观察到δ基因高强度表达.结论 利用巢式RT-PCR等成功构建了δ-pIRES2-EGFP表达质粒,并在HEK293细胞中实现了高效表达.
关键词：δ阿片受体巢式PCRpIRES2-EGFPHEK293
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30628018)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1351-1353 )
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