凋亡素原核表达载体的构建、表达与抗体制备
王健生1
张明鑫1
段小艺2
莫非1
王全颖3
杨广笑3
1.西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤外科,陕西,西安,7100612.西安交通大学医学院第一附属医院核医学科,陕西,西安,7100613.西安华广生物工程公司,陕西,西安,710025
摘要：目的 构建凋亡素基因的原核表达载体,进行表达并制备表达蛋白的多克隆抗体.方法 构建凋亡素 pGEM-T/Apoptin载体,并将凋亡素基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,将该质粒转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白.用表达蛋白常规免疫Balb/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清中抗体的滴度.结果 凋亡素基因被成功的克隆至pET-28a(+),表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子量约17 000的位置出现目的蛋白条带,大小与预期结果一致,Balb/c小鼠经5次免疫后,得到了滴度为1:5×10~5血清抗体.结论 凋亡素原核表达载体的成功构建和多克隆抗体的制备为进一步研究凋亡素的功能和凋亡素的应用研究奠定了基础.
关键词：凋亡素蛋白原核表达抗体制备
分类号：R730.54(一般性问题)
资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金(20060698055)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1405-1407 )
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