clpE缺陷对肺炎球菌蛋白表达的影响
张群
尹楠林
张雪梅
王虹
刘鑫
崔亚丽
尹一兵
胥文春
1.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000162.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000163.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000164.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000165.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000166.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000167.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,4000168.重庆医科大学医学检验教育部重点实验室,重庆,400016
摘要:目的 了解ClpE对肺炎球菌蛋白表达的影响.方法 用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺陷菌株;通过固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离野生菌和clpE缺陷菌的总蛋白质;经凝胶银染色、PDQuest 2DE软件分析获得 2个菌株的蛋白质表达谱;选取差异蛋白质点进行MEDLI-TOF质谱分析,查询数据库,获取有意义的蛋白点.结果 以肺炎链球菌D39的图谱为参考,△clpE与其匹配率为61%.挑选17个有明显差异表达的蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,获得了17张肽质量指纹图,经数据库查询后,4个蛋白点获得了有意义的结果,分别为:次黄嘌呤鸟嘌呤核糖核酸转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase),吡咯烷羧酸肽酶(pyrrolidone-carboxylate peptidasel),甲酸四氢叶酸连接酶(formate-tetrahydrofolate ligase)和双功能蛋白pyrR (bifunctional protein pyrR).结论 野生菌表达蛋白的种类和数量均高于突变菌株,提示clpE可通过影响某些特殊蛋白质的表达,帮助细菌适应宿主的不同环境,使宿主致病.
关键词:肺炎球菌双向凝胶电泳热休克蛋白clpE基因
分类号:R378(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
资助基金:国家自然科学基金(30800016)国家自然科学基金(30030040)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1533-1537,1540 )
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南方医科大学学报

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-4254
年,卷(期):2009,29(8)
所属栏目:基础研究