CEA慢病毒载体的制备及其在树突状细胞中的表达鉴定
郑红1
张文玲2
赵国强3
董子明3
1.郑州大学基础医学院,河南郑州450052;河南大学淮河临床学院,河南开封4750012.河南大学淮河临床学院,河南开封,4750013.郑州大学基础医学院,河南郑州,450052
摘要:目的 构建人癌胚抗原(CEA)慢病毒表达载体并包装成感染性病毒颗粒,获得稳定表达CEA的树突状细胞(DC).方法 以人CEA的测序质粒为模板,PCR扩增CEA全长,装入pLentiGFP转移质粒,经过测序证实其序列与标准序列完全一致.将pLentiGFP-CEA、包装质粒p△8.2和pVSV-G用LipofectamineTM2000共同转染293T细胞,包装成感染性病毒颗粒,感染树突状细胞,并进行RT-PCR和Western blot检验CEA在细胞中的表达.结果 DC细胞病毒感染48h后荧光显微镜观察CEA慢病毒载体在细胞中高效表达,PCR扩增可得到人CEA的2009 bp基因片段,与预期大小一致,Western blot显示CEA在感染DC中表达.结论 成功构建了CEA慢病毒表达载体,重组慢病毒感染DC细胞后表达出有活性的CEA蛋白,为进一步从分子水平探讨CEA的功能奠定了基础.
关键词:癌胚抗原慢病毒载体树突状细胞
分类号:R73-3(肿瘤学实验研究)
资助基金:创新工程项目(207150)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1834-1836 )
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南方医科大学学报

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-4254
年,卷(期):2009,29(9)
所属栏目:基础研究