人CAT启动子红色荧光蛋白报告基因载体的构建及功能鉴定
姚琦
黄劭
刘亚伟
刘靖华
姜勇
1.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105154.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105155.南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515
摘要:目的 构建人过氧化氧酶(CAT)启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,为进一步研究CAT表达调控奠定基础.方法 以人类基因组DNA为模板,PCR获得-404~+16大小的肩动子片段,将其定向插入pDsRed1-1载体,构建pDsRed-CATp红色荧光蛋白报告基因载体.瞬时转染NIH/3T3细胞,观察CAT启动子对H_2O_2刺激的反应.结果 pDsRed-CATp经双酶切及DNA测序分析鉴定准确无误;该载体瞬时转染N1H/3T3细胞,静息状态呈现弱转录,H_2O_2刺激后,转录水平明显增强.结论 成功构建CAT启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,对H_2O_2刺激反应良好,为研究CAT基因表达调控提供了有效的工具.
关键词:过氧化氢酶红色荧光蛋白调节基因报告基因
分类号:Q291(细胞生物学)R392.1(医学免疫学)
资助基金:长江学者和创新团队发展计划(IRT0731)国家自然科学基金(U0632004)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 2149-2151 )
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