彗星分析法研究靶向SMPD1的siRNA对小鼠卵母细胞凋亡的保护作用
张仁礼1
孟锦绣2
闻安民1
黄跃深3
周灿权4
王凯1
贾磊1
刘彩霞1
邓新燕5
陈系古5
1.广东省医学科学院/广东省人民医院生殖医学中心,广东,广州,5100802.广东省医学科学院/广东省人民医院医学研究中心,广东,广州,5100803.广东省医学科学院/广东省人民医院皮肤科,广东,广州,5100804.中山大学附属第一医院生殖医学中心,广东,广州,5100805.中山大学实验动物中心,广东,广州,510080
摘要：目的 建立彗星分析小鼠卵母细胞凋亡的模型,研究靶向酸性鞘磷酯酶1(SMPD1)的siRNA对卵子自发性凋亡的保护作用.为建立新的生殖保护方法奠定基础.方法 通过同源性分析并结合siRNA设计软件设计并化学合成靶向SMPD1的3条siRNA,用超排卵技术对雌性BALB/c小鼠进行超排卵并杀鼠取卵,利用显微注射的方法将siRNA分别导人超排获得的小鼠卵子.分别于48 h和72 h观察卵子形态学变化,通过彗星分析检测卵细胞DNA破坏程度来分析卵子自发性凋亡情况.结果 彗星分析法观察到小鼠卵母细胞在体外培养24 h可见少量DNA泳出,48 h可见大量DNA泳出:通过显微注射导人siRNA 48 h后的彗星分析结果显示,其中1对siRNA注射组,即siRNA003组的卵母细胞泳出量与其它2个siRNA注射组及对照组相比显著降低(P<0.01),其它2对siRNA注射组与对照组无明显差异.结论 靶向SMPD1的siRNA能够有效保护卵子的自发性凋亡,有望成为新的生殖保护方法.
关键词：酸性鞘磷脂酶1卵母细胞细胞凋亡RNA干扰彗星分析法
分类号：R321-33(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(30000474,30700327)广东省自然科学基金(4009374,9151009101000011,7300047)广东省医学科研基金(B2004038,B2006003)广东省人口计生委科研项目(2009227)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2165-2167,2170 )
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