KDR启动子驱动的双自杀基因对人结肠癌细胞的特异性杀伤作用
王朝阳
黄宗海
李强
姚晓军
俞金龙
历周
1.南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,5102822.南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,5102823.南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,5102824.南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,5102825.南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,5102826.南方医科大学珠江医院普外科,广东,广州,510282
摘要:目的 探讨腺病毒介导的KDR启动子驱动的双自杀基因系统CDglyTK对人结肠癌细胞SW480的特异性杀伤作用.方法 用腺病毒AdKDR-CDglyTK感染表达KDR的SW480细胞和不表达KDR的LS174T细胞,观察其感染效率并以RT-PCR方法检测重组腺病毒及转基因细胞CDglyTK的表达,然后给予不同浓度的前药5-FC及GCV处理,MTT法检测该系统对不同细胞株的杀伤效应和旁观者效应;用流式细胞术观察细胞内DNA含量和细胞周期的变化.结果 携带双自杀基因和报告基因(GFP)的重组腺病毒载体,感染复数为100时,95%以上的受感染SW480和LS174T细胞中有GFP表达.RT-PCR检测发现SW480细胞有目的 基因的表达,而LS174T细胞无表达.在前药应用下,已转染腺病毒的SW480和LS174T细胞表现出对前药不同的敏感性:表达KDR的SW480细胞对前药具有较高的敏感性,而不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P<0.01).将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养,观察到该系统有明显的旁观者效应.用流式细胞仪测定给药组出现典型的凋亡峰,细胞周期显示治疗组细胞G0-G1期比率增多,S期细胞减少.结论KDR启动子可调控双自杀基因体系选择性杀伤人结肠癌SW480细胞,抑制其增殖并诱导细胞凋亡.
关键词:人结肠癌细胞KDR启动子自杀基因腺病毒
分类号:R730.59(一般性问题)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA217171)广东省自然科学基金(103072)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 224-227,231 )
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南方医科大学学报

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-4254
年,卷(期):2010,30(2)
所属栏目:基础研究