pDsRed2-Nl-SDF-1α真核表达载体的构建及在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达
李明
张世忠
邹志浩
郭燕舞
卢凤飞
姜晓丹
寇盛斌
卢国辉
李振勇
1.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102822.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102823.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102824.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102825.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102826.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102827.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102828.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,5102829.南方医科大学珠江医院神经外科/广东神经外科研究所/广东省脑功能修复与再生重点实验室,广东,广州,510282
摘要：目的 构建pDsRed2-Nl-SDF-lα真核表达载体并转染骨髓间充质干细胞(MSCs),观察其在MSCs内的表达.方法 设计并合成SDF-1α基因引物,用RT-PCR法从小鼠平滑肌细胞中扩增出带有Xhol与EcoRI酶切位点的SDF-1α基因片段,将SDF-1α基因片段克隆到真核表达载体pDsRed2-N1上,酶切和测序鉴定.培养小鼠MSCs并Vimentin蛋白免疫荧光鉴定.通过脂质体将pDsRed2-N1-SDF-1α转染入小鼠MSCs.免疫荧光检测转染后的MSCs表达SDF-1α蛋白的情况.结果 扩增出的基因片断大小与基因文库中已知的SDF-1α序列大小完全相符,酶切也得到目的 基因片断,测序结果 显示与已知的SDF-1α序列相同,成功构建pDsRed2-Nl-SDF-1α真核表达载体.培养的细胞经Vimentin蛋白免疫荧光检测为阳性,pDsRed2-N1-SDF-1α表达载体转染到MSCs,24 h后细胞免疫荧光检测可见SDF-1α融合蛋白表达.结论 pDsRed2-N1-SDF-1α真核表达载体能够在小鼠MSCs中表达SDF-1α蛋白.
关键词：SDF-1α蛋白骨髓间充质干细胞真核表达载体
分类号：R331.22(人体生理学)R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30772232)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 439-442 )
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