引入CpG基序的嗜肺军团菌lgA基因真核表达质粒的构建及其在NIH3T3细胞中的表达
景彩霞1
杨加周2
刘明杰3
徐佳楠3
关望3
许颖3
陈建平3
1.四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室,四川,成都,610041;延安大学医学院,陕西,延安,7160002.延安大学医学院,陕西,延安,7160003.四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室,四川,成都,610041
摘要：目的 构建了引入CpG基序的lvgA基因的真核表达质粒pclvgA/CpG,并在NIH3T3细胞中表达.方法 采用PCR方法 将特定CpG基序作为核酸佐剂构建于嗜肺军团菌lvgA基因侧翼,定向克隆人真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(+),构建重组质粒pclvgA/CpG,体外阳离子脂质体转染法转染NIH3T3细胞.结果 通过测序证实真核表达质粒pclvgA/CpC中lvgA/CpC克隆片段长为657 bp,推测lvgA基因编码蛋白大小约为27.7 Ku,lvgA基因及两侧翼原设计CpG基序完整扩出,测序序列与设计序列完全符合.用免疫荧光检测重组质粒在NIH3T3细胞中瞬时表达.结论 本实验成功构建了嗜肺军团菌pclvgA/CpG真核表达质粒,并在NIH3T3细胞检测到其瞬时表达信号.
关键词：嗜肺军团菌CpG基序lvgA表达NIH3T3细胞
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金(20060610091)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 468-471,481 )
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