地高辛标记斑马鱼cd99l2基因RNA探针的制备
温宗华1
张艳2
吴自勍2
周新华2
韩西群2
张文清3
赵彤4
1.南方医科大学南方医院病理科,广东,广州,5105152.南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学细胞生物学教研室,广东,广州,5105154.南方医科大学南方医院病理科,广东,广州,510515;南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的 制备用于斑马鱼胚胎早期cd99l2基因时空表达检测的地高辛标记RNA探针.方法 设计引物,构建cd99l2/pGM-T重组质粒,用SacII和SalI分别进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6 RNA聚合酶和T7RNA聚合酶转录合成地反义和正义地高辛标记的RNA探针,用整体原位杂交法检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的表达.结果 成功构建了cd99l2/pGM-T重组质粒,体外转录获得反义和正义RNA探针,反义探针杂交检测证实cd99l2基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中中枢神经系统呈现高表达,正义探针未检测到表达信号.结论 本研究制备的反义cd99l2 RNA探针,兼顾了特异性和敏感性,能有效检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的定位表达,而正义探针可以作为阴性对照,为进一步探究cd99l2基因在斑马鱼发育过程中的作用机制奠定了基础.
关键词：斑马鱼原位杂交探针cd99l2
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30770908)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 969-972 )
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