杆状病毒多基因表达系统介导的轮状病毒样颗粒表达与组装
龙虎1
姚伦广2
王姗姗3
陈士新4
谭佩婵3
孙京臣3
1.华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510642;南阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室,河南,南阳,4730612.南阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室,河南,南阳,4730613.华南农业大学动物科学学院,广东,广州,5106424.海军广州基地赤沙干休所,广东,广州,510230
摘要：目的 构建能同时表达轮状病毒vp2、vp6、vp7基因的重组家蚕杆状病毒,并在BmN细胞中进行初步表达.方法 利用MA104细胞繁殖人A组轮状病毒,RT-PCR扩增病毒结构蛋白vp2、vp6、vp7基因,连接至转移载体pFBDM和pUCDM中,同时引入含IE1启动子的绿色荧光蛋白基因利于检测感染和表达量,再分别通过Tn7及Cre-LoxP重组构建重组病毒.为方便检测基因的表达,在VP7的C-末端添加6-组氨酸(6-His)标签,可通过ELISA等方法快速检测目的 基因表达.结果 扩增获得了轮状病毒三个结构蛋白基因,构建了能高效组装轮状病毒样颗粒的重组表达载体,ELISA检测VP7得到了表达,在BmN细胞中观察到病毒样颗粒.结论 成功构建杆状病毒多基因的表达系统,为生产多哑基蛋白复合物,研究大分子结构提供借鉴.
关键词：轮状病毒样颗粒家蚕杆状病毒多基因表达系统BmN细胞疫苗
分类号：Q939.47(微生物分类学（系统微生物学）)R512.5(传染病)S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家自然科学基金(30700750)广东省自然科学基金(7006695)华南农业大学校长基金(2008X002)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1491-1495 )
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