靶向沉默人基因MDC1表达对食管癌细胞放射增敏作用的实验研究
刘志坤
祝淑钗
苏景伟
王玉祥
杨洁
李娟
沈文斌
1.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,0500112.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,0500113.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,0500114.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,0500115.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,0500116.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,0500117.河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,050011
摘要：目的 利用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109细胞MDC1基因表达,观察其对细胞周期和放射敏感性的影响.方法 构建MDC1基因的干扰质粒pMDC1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,采用Real-Time PCR和western blotting测定MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达.采用流式细胞术和克隆形成实验,检测RNA干扰对ECA109细胞放射敏感性的影响.结果 成功构建pMDC1-shRNA质粒,转染ECA109细胞.获得稳定转染细胞株ECA109/MDC1,基因MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显降低;5 Gy射线照射后12 h、24 h、48 h,ECA109/MDC1的G2M期比例明显低于阴性对照组和空白对照组;ECA109、ECA109/NEGATIVE、ECA109/MDC1细胞的D0值分别为3.06 Gy、2.90 Gy、1.88 Gy;SF2值分别为0.91、0.89、0.84;Dq值分别为1159、1.47、1.20,显示ECA109/MDC1的D0值、SF2值、Dq值均明显降低.结论 RNAi技术可以有效地抑制食管癌细胞ECA109中基因MDC1的表达,从而增强ECA109细胞对放射线的敏感性.
关键词：MDC1细胞周期放射敏感性RNA干扰
分类号：R735.1(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30470524)国家自然科学基金(30870743)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1830-1834 )
英文信息