简易大鼠海马神经元原代培养方法及神经元兴奋性检测
张小娟
李廷玉
刘友学
陈洁
瞿平
魏小平
何剑
1.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,4000142.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,4000143.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,4000144.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,4000145.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,4000146.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,4000147.重庆市儿科医学研究所儿童营养研究中心,重庆,400014
摘要：目的 对原有大鼠海马神经元原代培养方法进行改进,在获得数量多、纯度高、体外生长时间长的神经细胞的同时,简化操作流程、节省时间、减少污染.方法 分离24h内出生的Wistar大鼠双侧海马,采用机械吹打法,以沉降法代替过滤制备单细胞悬液,细胞接种24h后培养液更换为添加B27的DMEM/F12无血清培养基,以后每周半量换液2～3次.用倒置相差显微镜观察细胞形态,利用神经元特异性标志物神经元特异烯醇化酶(NSE)鉴定神经细胞的纯度,并以钙影像仪测定KCl作用神经元后细胞的钙离子浓度变化,了解神经元的兴奋性.结果 此简易方法节约操作时间及科研成本,减少了污染的机会.所培养的神经元杂质少、纯度高、细胞活性好,体外存活时间长.结论 该方法简便可行,结果稳定,用该方法培养的大鼠海马神经元可作为神经元体外培养的良好实验模型.
关键词：大脑皮质神经元细胞原代培养免疫组织化学
分类号：R-331(实验医学、医学实验)
资助基金：国家自然科学基金(30600495)
论文发表日期：2010-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2080-2083 )
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