鼠抗沙眼衣原体Tarp蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
王洁1
张颖骞2
钟光明2
余平1
1.中南大学基础医学院免疫学系,湖南,长沙,4100782.美国德克萨斯大学圣安东尼奥健康科学中心微生物学免疫学系,圣安东尼奥,78229,USA
摘要：目的 制备抗衣原体Tarp蛋白的单克隆抗体,为探讨Tarp蛋白的生物学特性及功能提供实验工具.方法 克隆表达沙眼衣原体血清型D重组Tarp融合蛋白,并以其为免疫原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,应用间接免疫荧光法筛选阳性克隆和有限稀释克隆化,获得鼠抗沙眼衣原体血清型Dtarp蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA法鉴定单克隆抗体的抗Tarp特异性.并应用问接免疫荧光法鉴定单克隆抗体的亚类和衣原体种属特异性.结果 成功克隆表达了重组GST-Tarp融合蛋白,其相对分子质量约为136 000;成功地建立了7株稳定分泌抗Tarp蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株;7株单克隆抗体均特异性的识别Tarp蛋白而不识别其他衣原体性蛋白;2株单克隆抗体(R586.2和R8G7.2)的免疫球蛋白亚类为IgG2a,其余5株单克隆抗体(R4D5,R2HI.2,R12812,R2H7和RSG8.1)的免疫球蛋白亚类均为IgG1;7株单克隆抗体全部特异性识别衣原体血清型A、D、L2,而不识别MoPn、6BC和AR39.结论 获得了特异性识别沙眼衣原体血清型Dtarp蛋白的单克隆抗体,为Tarp蛋白的结构及生物学功能研究莫定了基础.
关键词：沙眼衣原体Tarp单克隆抗体
分类号：R374(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2219-2223 )
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