Cycl慢病毒干扰载体的构建及在鼻咽癌细胞中干扰效率检测
刘真1
王红艳1
龙捷1
方唯意2
1.广州医学院病理教研室,广东广州,5101822.南方医科大学肿瘤研究所,广东广州,510515
摘要:目的 检测Cycl在鼻咽癌中的表达.构建稳定干扰Cycl慢病毒载体及检测其在鼻咽癌细胞中的干扰效率.方法 应用基因芯片技术检测Cycl基因在鼻咽癌组织中的表达.Real-time PCR确证Cycl基因在鼻咽癌组织和细胞中高表达.构建重组靶向Cycl的shRNA慢病毒质粒pLentiU6/Cycl-shRNA.建立稳定干扰Cycl基因的鼻咽癌细胞系,荧光定量PCR检测干扰效率.结果 基因芯片检测显示,Cycl基因在鼻咽癌组织中高表达.qRT-PCR确证了墓因芯片结果的可靠性.在8个鼻咽癌细胞株中,Cyc1基因基本上都显示了高表达,其中最高的为鼻咽癌5-8F细胞.测序验证pLentiU6/Cycl-shRNA重组质粒构建成功.重组质粒能明显稳定地抑制Cycl基因在鼻咽癌细胞中的表达.结论 Cycl 基因在鼻咽癌中高表达.构建的靶向Cycl基因的慢病毒载体能明显抑制其表达.这为研究Cycl基因在鼻咽癌中的功能及分子机制奠定了基础.
关键词:Cycl重组质粒RNA干扰鼻咽癌细胞
分类号:R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(u0732006)广东省医学科研基金(B2007088,B2008077)广东省高等学校优秀青年创新人才培养计划(育苗工程)项目(LYM08084)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 2629-2632 )
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