人羊膜间充质细胞的分离培养及向胰岛样细胞诱导分化
彭琳1
王建2
卢光绣2
1.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100832.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,410083;人类干细胞国家工程研究中心,湖南,长沙,410078
摘要：目的 分离培养人羊膜间质细胞(hAMCs),初步探讨其向胰岛样细胞的诱导分化.方法 羊膜组织经胰蛋白酶消化去除上皮细胞后,采用胶原酶I联合中性蛋白酶的方法分离hAMCs.细胞免疫荧光检测分离得到细胞表面标记Vimentin+,SSEA-4+表达;流式细胞仪检测CD29,CD90及CD34,CD45表达;RT-PCR检测ACTG2、ACTA2、MMP2、Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4基因表达;添加诱导因子诱导hAMCs向胰岛样细胞分化.结果 分离得到的hAMCs可体外长期传代,并保持稳定的遗传学特性;细胞表现vimentin+、SSEA-4+;CD29、CD90表达量分别为91.5%±9.93%和48.7%±9.47%;不表达CD34,CD45;表达ACTG2、ACTA2、MMP2和Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4等基因.诱导后的细胞表达insulin、PDX1、ngn3、glucagon等基因,并表现insulin+.结论 建立了人羊膜间充质细胞的分离培养方法;在体外可诱导分化为胰岛样细胞.
关键词：人羊膜间充质细胞干细胞特性胰岛样细胞诱导分化
分类号：R335.6(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(30700272)教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20070533080)湖南省科技计划(2009FJ3180)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 5-10 )
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