腺病毒滴度不同测定方法比较
孙鹏宇1
张艳玲2
荆玉明1
张信基1
张哲欢1
黎诚耀2
陈白虹2
谭万龙1
李红卫2
1.南方医科大学南方医院泌尿外科,广东,广州,5105152.南方医科大学生物技术学院,广东,广州,510515
摘要：目的 将目前测定腺病毒滴度常用的OD260法、荧光定量PCR法、绿色荧光蛋白标记法、壳蛋白免疫法、细胞病变(CPE)法进行比较研究,分析和讨论各种方法的优缺点.方法 4种重组腺病毒(Ad-G-AT2R-EGFP、Ad-CMV-EGFP、Ad-mif-shRNA-EGFP和Ad-CBA-GFP)扩增、纯化后,同时分别用OD260值法、荧光定量PCR法、绿色荧光蛋白标记法、壳蛋白免疫法及CPE法测定病毒滴度,并以壳蛋白免疫法测定结果作为标准,对各种方法所得结果进行比较研究.结果 绿色荧光蛋白标记法、CPE法与壳蛋白免疫法同时测定4种腺病毒滴度,其结果无统计学差异(P＞0.1).荧光定量PCR法测定值明显高于壳蛋白免疫法(P＜0.05),但与该法测定结果间存在良好的相关性(r=0.965),约为壳蛋白免疫法所测得结果的10倍.OD260法测得结果与壳蛋白免疫法测得结果间则无相关性.结论 绿色荧光蛋白标记法与壳蛋白免疫法是测定腺病毒感染性滴度最为快速有效的方法,其结果客观可靠,能真实地反映病毒的实际感染力.荧光定量PCR法测定结果反映的是完整的病毒颗粒数,能够间接反映病毒的感染力,且该方法操作简单,耗时短,同样有较高的实用性.
关键词：腺病毒病毒滴度测定壳蛋白免疫法绿色荧光蛋白荧光定量PCR细胞病变法
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81072113)国家重点实验室开放基金(SKLBC2010K05)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 234-238 )
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